利用細(xì)胞體積和密度進(jìn)行分離純化的技術(shù)均基于沉降作用。其基本原理是,在離心力的作用下,細(xì)胞在一定介質(zhì)中的的沉降速率與細(xì)胞的體積及細(xì)胞密度和其周圍介質(zhì)的密度之差成正比。細(xì)胞的體積越大,其余分離介質(zhì)的密度差越大,則細(xì)胞的沉降速率越快。對(duì)于特定的待分離細(xì)胞來(lái)說(shuō),其體積和密度是恒定的,可供選擇的只是具有一定密度與黏度的分離介質(zhì)。使之沉降的細(xì)胞密度應(yīng)該比介質(zhì)大,而使之漂浮的細(xì)胞密度應(yīng)該比介質(zhì)小。因此實(shí)施沉降技術(shù)分離細(xì)胞的關(guān)鍵在于選擇密度梯度形成介質(zhì),故稱將技術(shù)也稱為密度梯度離心技術(shù)。
逆流淘析分離技術(shù)是通過(guò)含細(xì)胞介質(zhì)溶液的流力和福利與細(xì)胞所受離心力之間相互作用而分離細(xì)胞的一種技術(shù)。細(xì)胞置于一特殊的離心室中,離心室成錐形狀,其定點(diǎn)指向沉降方向,細(xì)胞懸浮于以向心方向連續(xù)流動(dòng)的介質(zhì)溶液中,同時(shí)受到離心力的作用。當(dāng)向外的離心力于內(nèi)向的流立即浮力達(dá)到平衡時(shí),每個(gè)細(xì)胞將按照它的的沉降速率達(dá)到其平衡位置。通過(guò)這一技術(shù)可進(jìn)一步分離淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。
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