主營(yíng)產(chǎn)品： 各種標(biāo)準(zhǔn)品、試劑、染色液、培養(yǎng)基、抗體、試劑盒、透析袋 細(xì)胞、實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器 組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

2017/10/13 11:24:19 閱讀(798) 【詳細(xì)說(shuō)明】

組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

（中文版）

主要用途

 組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)三肽化合物底物馬尿酰組氨酰亮氨酸，在血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1抑制劑的存在下，受到血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2的水解，釋放出組氨酰亮氨酸，與非熒光性染料鄰苯二甲醛反應(yīng)產(chǎn)生高度熒光的二肽加合物后熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定組織裂解萃取樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲(chóng)等）血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）的特異活性檢測(cè)，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，具有高通量、自動(dòng)化操作的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)背景

血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（angiotensin I-converting enzyme；ACE；EC3.4.15.1），又稱為肽基二肽酶A（peptidyl dipeptidase A）、羧基組織蛋白酶（carboxycathepsin）或激肽酶II（kininase II），是一種體細(xì)胞類150至180KD、生殖細(xì)胞類90至110KD的多肽外切酶（exopeptidase）和鋅金屬肽酶（zinc metallopeptidase）。血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶有2種同工酶：1型和2型，其間80至90%同源。I型主要存在于肺毛細(xì)管細(xì)胞內(nèi)，也在血管內(nèi)皮細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞和睪丸leydig細(xì)胞膜中表達(dá)；II型主要存在于心臟和腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上。ACE在腎素-血管緊張素-醛固酮（aldosterone）系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。作為血管收縮劑（vasoconstrictor），ACE催化十肽血管緊張素I的C末端的組胺酰亮氨酸（histidylleucine）二肽的切離水解反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為血管緊張素II；同時(shí)作為血管擴(kuò)張劑（vasodilator），ACE使緩激肽（bradykinin）失活。ACE常用于藥物靶標(biāo)，治療高血壓（例如噻嗪化物thiazide）、心力衰竭（例如利尿靈furosemide）、糖尿病*和SARS等疾患。基于人工合成的三肽化合物底物N-馬尿酰-L-組氨酰-L-亮氨酸（hippuryl-L-histidyl-L-leucine；HHL），在血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1抑制劑甲羥孕酮醋酸酯（Foroxymithine）的存在下，受到血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2的水解，釋放出組氨酰亮氨酸（L-histidyl-L-leucine；HL），與非熒光性染料鄰苯二甲醛（o- phthaldialdehyde；OPA）反應(yīng)，生成高度熒光的二肽加合物后熒光峰值的變化（激發(fā)波長(zhǎng)360nm，散發(fā)波長(zhǎng)485nm），來(lái)定量測(cè)定血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2的特異活性。血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：

產(chǎn)品內(nèi)容

 清理液（Reagent A） 毫升

 裂解液（Reagent B） 毫升

 緩沖液（Reagent C）  毫升

 底物液（Reagent D）   微升

 終止液（Reagent E）   毫升

 反應(yīng)液（Reagent F）  微升

 中和液（Reagent G）   微升

 標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent H）   微升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份

保存方式

保存 底物液（Reagent D）、 反應(yīng)液（Reagent F）和 標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent H）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里； 底物液（Reagent D）和 反應(yīng)液（Reagent F）避免光照； 終止液（Reagent E）和 中和液（Reagent G）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月

用戶自備

15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器

1.5毫升離心管：用于樣品制備和儲(chǔ)存的容器

超速離心管：用于樣品離心的容器

臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品沉淀

4℃超速離心機(jī)：用于分離膜蛋白成分

DOUNCE勻漿器：用于裂解組織細(xì)胞

培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育

比色皿或96孔板：用于比色的容器

熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑置入冰槽里融化。 反應(yīng)液（Reagent F）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。 上一篇：細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性熒光定 下一篇：活體組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）返回列表 *驗(yàn)證碼:  = 請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果（填寫(xiě)阿拉伯?dāng)?shù)字），如：三加四=7