A2780/DDP細(xì)胞用GIBCO公司RPMI1640或高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),補(bǔ)加10-12%進(jìn)口優(yōu)質(zhì)胎牛血清和常規(guī)的雙抗即可。
細(xì)胞買回去以后現(xiàn)擴(kuò)增凍存一批保種,然后加DDP 2 mmol/L 處理10天就可以開始實(shí)驗(yàn)了。
細(xì)胞消化: 0.25%Trypsin + 0.02%EDTA; 細(xì)胞凍存:用10%DMSO + 90%進(jìn)口血清
HCT-8/V( VCR終濃度1 g/ml)操作說(shuō)明:
HCT-8/V細(xì)胞,中文名稱:HCT-8耐長(zhǎng)春新堿結(jié)腸癌細(xì)胞。是一款素爾細(xì)胞庫(kù)熱賣產(chǎn)品之一,VCR終濃度1 g/ml。HCT-8/V細(xì)胞,素爾生物用GIBCO公司RPMI1640或高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),補(bǔ)加10-12%德國(guó)SERANA原裝進(jìn)口優(yōu)質(zhì)胎牛血清和常規(guī)的雙抗即可。收到HCT-8/VCR細(xì)胞后先擴(kuò)增凍存一批保種,然后在實(shí)驗(yàn)前用VCR終濃度1 g/ml的培養(yǎng)基處理細(xì)胞10天,把非耐藥的細(xì)胞除掉,然后再開始實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞消化: 0.25%Trypsin + 0.02%EDTA; 細(xì)胞凍存:用10%DMSO + 90%血清。
HEK-293-6e細(xì)胞使用F17+L谷氨酰胺培養(yǎng)液,37℃ 下置于5%CO2培養(yǎng)箱中。待細(xì)胞融合至80%,用0.25%胰酶消化傳代后接種(細(xì)胞密度5 XlO4)于培養(yǎng)瓶或孔板,待細(xì)胞融合至約70%后用于實(shí)驗(yàn)。需要設(shè)備是:搖床(提前準(zhǔn)備)
MCF-10A細(xì)胞株為素爾細(xì)胞庫(kù)的佼佼者,熱賣推薦細(xì)胞株之一,代數(shù)靠前,狀態(tài)穩(wěn)定,細(xì)胞飽滿,有光澤。素爾細(xì)胞庫(kù)擁有400多株細(xì)胞株細(xì)胞系,20多株耐藥株,并且提供Identi trade; STR Cas9穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株系列、 Identi trade; STR示蹤細(xì)胞株系列、Identi trade; STR細(xì)胞株系列、示蹤細(xì)胞、穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建、 細(xì)胞代感染、篩藥細(xì)胞株產(chǎn)品、篩藥細(xì)胞株定制。
產(chǎn)品名稱: MCF-10A細(xì)胞
中文名稱: 人正常乳腺上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng) 懸浮生長(zhǎng) 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài):成纖維樣 多角形 上皮樣 圓形 梭形 球形 不規(guī)則形
細(xì)胞背景:MCF-10A細(xì)胞是一個(gè)非致瘤的上皮細(xì)胞株。 這株細(xì)胞通過(guò)在低鈣離子濃度的無(wú)血清培養(yǎng)液中長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)而得到。MCF 10A是從群體中的貼壁細(xì)胞繁衍得到的。也有從懸浮群體繁衍得到的細(xì)胞(見MCF 10F, ATCC CRL-10318)。 細(xì)胞呈唾液酸粘蛋白陽(yáng)性, 細(xì)胞角蛋白陽(yáng)性, 牛奶脂肪球抗原陽(yáng)性。在膠原中表現(xiàn)出三維生長(zhǎng), 并在長(zhǎng)滿后形成圓頂狀。 因而, 細(xì)胞沒(méi)有終端分化或蓑老的表型。這株細(xì)胞對(duì)胰島素、糖皮質(zhì)激素、霍亂毒素和表皮生長(zhǎng)因子(EGF)有響應(yīng)。 在電子顯微鏡下特征象燈管細(xì)胞而不象肌上皮細(xì)胞。 通過(guò)MFA-Breast和MC-5單克隆抗體檢測(cè)陽(yáng)性表明它表達(dá)乳房特異性抗原。 培養(yǎng)液中的鈣離子濃度對(duì)細(xì)胞形態(tài)有重要影響。
培養(yǎng)條件:DMEM.MEM.1640.IMDM.F12.DMEM/F12+10% FBS
培養(yǎng)條件:1:2傳代
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):無(wú)支原體、無(wú)細(xì)菌、無(wú)真菌、符合標(biāo)準(zhǔn)
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
細(xì)胞數(shù)量:500000cells/瓶
儲(chǔ)存方法:液氮(凍存)或復(fù)蘇培養(yǎng)。
運(yùn)輸方式:凍存的細(xì)胞干冰運(yùn)輸,復(fù)蘇的細(xì)胞冰袋運(yùn)輸。
特惠價(jià)格:致電 ( )
MCF-10A細(xì)胞株到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
微生物及支原體檢測(cè):陰性
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項(xiàng):
1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。
4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們。
5、在操作計(jì)數(shù)前要將未待測(cè)懸液吹打均勻;滴入細(xì)胞懸液時(shí)蓋玻片下不要出現(xiàn)氣泡;若滴入懸液時(shí)的量太多,會(huì)使細(xì)胞懸液流入旁邊的槽中。
上海素爾生物提供400多種類細(xì)胞株細(xì)胞系,20多株穩(wěn)定耐藥株,國(guó)產(chǎn)細(xì)胞,進(jìn)口細(xì)胞,復(fù)蘇細(xì)胞,凍存細(xì)胞,原代細(xì)胞,植物細(xì)胞,干細(xì)胞,腎臟細(xì)胞,生殖細(xì)胞,小鼠正常細(xì)胞,大鼠正常細(xì)胞等。
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Hep G2 人肝癌細(xì)胞 human hepatocellular carcinoma cell line
Hep 3B 人肝癌細(xì)胞 human hepatocellular carcinoma cell line
HL-7702 人肝細(xì)胞 human hepatocyte
BEL-7402 人肝癌細(xì)胞 human hepatocellular carcinoma cell line
HuH-7 人肝癌細(xì)胞 human hepatocellular carcinoma cell line
MHCC97-L 人低轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞 human hepatocellular carcinoma cell line low metastatic potential subline
MHCC97-H 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞 human hepatocellular carcinoma cell line high metastatic potential subline
原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培 養(yǎng);因此,較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。不同的原代細(xì)胞傳代次數(shù)不同,具體需咨詢客服人員或者自行查閱 相關(guān)資料。
細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培 養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來(lái)講,理論上可培養(yǎng)到40-50代。
客戶應(yīng)具有一定細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí)與經(jīng)驗(yàn),并具備基本培養(yǎng)條件(細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,無(wú)菌操作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱,可拍照倒置顯微鏡等),并按說(shuō)明書要求準(zhǔn)備好相應(yīng)的無(wú)菌的培養(yǎng)基、血清、雙抗、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板等。如果因客戶缺少基本培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)和培養(yǎng)條件而導(dǎo)致細(xì)胞死亡或污染,不在我司售后責(zé)任之內(nèi)。
潔凈區(qū),并不是沒(méi)有細(xì)菌,而是細(xì)菌的數(shù)量非常少,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)100級(jí)的潔凈標(biāo)準(zhǔn)是浮游菌數(shù)不得超過(guò)5個(gè)每立方米,沉降菌數(shù)不得超過(guò)1個(gè)每培養(yǎng)皿.而國(guó)外的標(biāo)準(zhǔn)比我國(guó)的還要高一點(diǎn),要求的數(shù)量更少。在我們的潔凈操作臺(tái)里,并不是真正一個(gè)細(xì)菌都沒(méi)有的,所以在操作的時(shí)候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進(jìn)入培養(yǎng)體系細(xì)菌的數(shù)量。 處理細(xì)菌污染的重要原則就是:無(wú)限地稀釋細(xì)菌的濃度,無(wú)限地減少細(xì)菌的數(shù)量! 1).將污染的培養(yǎng)液倒掉,轉(zhuǎn)燒瓶口,加入10mlPBS,適當(dāng)晃動(dòng)清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。 2).繼續(xù)加入10mlPBS,同樣方法晃動(dòng),清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。 3).繼續(xù)加入5mlPBS,同樣方法洗瓶,主要是培養(yǎng)面,然后倒掉。 4).重復(fù)步驟3再洗。 5).重復(fù)步驟3再洗。 6).加入3-5ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。 7).加入3ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。 8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。 9).加入10ml培養(yǎng)液,加入2ml雙抗,放置培養(yǎng)箱培養(yǎng),5小時(shí)之后,倒掉培養(yǎng)基,加入PBS洗瓶?jī)纱?,然后加入胰酶消化,吹打后置于離心機(jī)800-1000r/min離心,然后洗一次。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。 10).24h之后,視情況換液,若仍然污染嚴(yán)重,培養(yǎng)基渾濁,重復(fù)以上步驟,若看不到污染物,則繼續(xù)步驟1)、3)、4)、6)、8),然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗. 11).24h之后,若仍污染嚴(yán)重,可再重復(fù)一次,若還污染只能棄之(不過(guò)一般沒(méi)有出現(xiàn)這種情況),若鏡下不見污染物,則換液PBS洗瓶,正常培養(yǎng)。 以上是對(duì)于細(xì)菌污染(常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌);若為霉菌或者真菌污染,加入兩性霉素B清洗和培養(yǎng),終濃度一般為2.5 g/ml(在30 g/ml時(shí)會(huì)有細(xì)胞毒性)。另外也可以選擇在培養(yǎng)基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D。其它操作同;若為支原體或者黑膠蟲污染,基本上都是重新弄細(xì)胞了。對(duì)于黑膠蟲污染,我們會(huì)預(yù)防為主?;旧系聡?guó)SERANA胎牛血清、GIBCO胎牛血清中不含黑膠蟲,我們建議購(gòu)買!以上方法主要是針對(duì)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,在操作的過(guò)程中,一定要小心操作動(dòng)作,輕柔緩慢,切忌大動(dòng)作魯莽。防止細(xì)胞脫落。
咨詢 發(fā)貨周期,來(lái)源,說(shuō)明書,訂購(gòu)流程,售后說(shuō)明書,請(qǐng)致電客服,人結(jié)腸癌細(xì)胞,人卵巢癌細(xì)胞,人肺癌細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞,人腎臟細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞等熱賣產(chǎn)品盡在素爾生物
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精氨酸脫羧酶 3ml
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VP-MR肉湯 3ml VP-MR測(cè)定
Cary-Blain運(yùn)送培養(yǎng)基 3ml 用于致病菌標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和保存
半固體瓊脂 3ml 用于一般菌株保存與動(dòng)力觀察
甘露醇瓊脂 斜面 甘露醇試驗(yàn)
SS增菌液 10ml 沙門氏、志賀氏菌增菌培養(yǎng)
堿性蛋白胨水 10ml 霍亂弧菌增菌培養(yǎng)
七葉靈瓊脂 高層 測(cè)定細(xì)菌分解七葉靈的能力
三糖鐵瓊脂 斜面 腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定
克氏雙糖鐵瓊脂 斜面 腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定
蛋白胨水 3ml 產(chǎn)吲哚試驗(yàn)
沙保羅瓊脂 斜面 供真菌及酵母樣菌分離培養(yǎng)
Kohn明膠管 肉湯明膠 測(cè)定細(xì)菌液化明膠、快速、敏感
硝酸鹽產(chǎn)氣管 半固體 硝酸鹽試驗(yàn)
亞硝酸鹽產(chǎn)氣管 半固體 亞硝酸鹽試驗(yàn)
鳥氨酸脫羧酶 3ml 測(cè)定細(xì)菌分解氨基酸的能力
葡萄糖酸鹽培養(yǎng)基 3ml 葡萄糖酸鹽試驗(yàn)
西蒙氏枸櫞酸鹽 斜面 枸櫞酸鹽利用實(shí)驗(yàn)
MIU培養(yǎng)基 高層 動(dòng)力-靛基質(zhì)-尿素實(shí)驗(yàn)
SIM培養(yǎng)管 高層 硫化氫-動(dòng)力-靛基質(zhì)實(shí)驗(yàn)
硫化氫培養(yǎng)管 高層 硫化氫試驗(yàn)用
乙酰胺培養(yǎng)管 斜面 乙酰胺利用試驗(yàn)
氧化/發(fā)酵管 半固體 細(xì)菌氧化發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
玉米吐溫80瓊脂 斜面 觀察厚膜孢子及假菌絲
TTC沙保羅瓊脂 斜面 同沙保羅瓊脂
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 斜面 同玉米吐溫瓊脂
羅琴改良培養(yǎng)基 斜面 供結(jié)核菌的分離培養(yǎng)用
伊紅美藍(lán)瓊脂/SS瓊脂 9cm 主要分離腸道菌
TCBS瓊脂/4號(hào)瓊脂 9cm 分離霍亂弧菌
血瓊脂/麥康凱瓊脂 9cm 分離尿、膽汁、膿汁等標(biāo)本致病菌
麥康凱瓊脂/TCBS瓊脂 9cm 用于分離糞便等標(biāo)本的腸道致病菌和致病弧菌
血瓊脂/巧克力瓊脂 9cm 用于分離痰、腦脊液、分泌物等標(biāo)本的致病菌
血瓊脂/中國(guó)藍(lán)瓊脂 9cm 分離尿、膽汁、膿汁等標(biāo)本致病菌
血瓊脂/伊紅美藍(lán)瓊脂 9cm 分離尿、膽汁、膿汁等標(biāo)本致病菌
血瓊脂/巧克力+萬(wàn)古霉素瓊脂 9cm 分離霍亂弧菌用
血液增菌培養(yǎng)基 10 30ml 采用進(jìn)口原料
血液增菌培養(yǎng)基 10 30ml 采用國(guó)產(chǎn)原料
L型細(xì)菌增菌液 10 30ml L型細(xì)菌的增菌培養(yǎng)
雙相血培養(yǎng)瓶 瓊脂+40ml肉湯 用于血液及其他體液的增菌
厭氧血培養(yǎng)瓶 10 30ml 含多種生長(zhǎng)因子、營(yíng)養(yǎng)豐富
非發(fā)酵菌科(Rap.N-15) 10T IND、NO3I、NO3II、液體石蠟
葡萄球菌(Rap.S-16) 20T NO3I、NO3II、VPI、VPII、液體石蠟
酵母菌同化(KT-16C) 10 顯色判讀
鏈球菌鑒定試劑(STREP) 10T VPI 、VPII
衣原體檢測(cè)試劑盒 20T 常溫提LPS測(cè)定
嗜酸性粒細(xì)胞染色液 3 10ml 有效期1年
過(guò)氧化物酶染色液 60ml 1 2-8℃保存,有效期6個(gè)月
鐵染色液 4 25ml 有效期6個(gè)月
精子體外染液 2 25ml用于精子的體外染色、記數(shù)。有效期1年
精子稀釋液 4 25ml 精液稀釋用。有效期1年
婦科白帶涂片快速染液 4 25ml 用于婦科白帶涂片等的多項(xiàng)快速檢查。有效期1年
H-E快速單一染色液 2 250ml 操作簡(jiǎn)便,一步完成,適用于婦科體驗(yàn)。有效期1年
蘇木素-伊紅染色液 2 500ml病理組織切片良好的染色液之一。有效期1年
巴氏染色液 組 經(jīng)典的病理染色液
快速巴氏染色液I 200ml 快速二步法:適用于陰道、子宮頸等分泌物染色
快速巴氏染色液II 二步法:適用于痰液、胃液等分泌物染色
膽汁七葉苷 高層 用于腸球菌的分離腸桿菌科(Rap.E-15) 20T IND、MR、液體石蠟
革蘭氏陰性桿菌(KONT 20E) 20T IND、NO3I、NO3II、VPI、VPII、TDA、液體石蠟
如果需要凍存形式,這類產(chǎn)品對(duì)溫度極為敏感,需要液氮保存。在運(yùn)輸過(guò)程中,只能以干冰形式運(yùn)輸,訂購(gòu)此類產(chǎn)品容易出現(xiàn)意外,所以必須要格外謹(jǐn)慎,說(shuō)明書一般會(huì)指示細(xì)胞株會(huì)加干冰運(yùn)輸。并且要求客戶收到后液氮儲(chǔ)存,本公司強(qiáng)烈建議,您收到冷凍運(yùn)輸?shù)募?xì)胞株一類產(chǎn)品后要立即復(fù)蘇。不能正常復(fù)蘇的,售后期限內(nèi)投訴,我們會(huì)盡力解決。