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菌絲生命體經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇: 你的蛋白該配上哪種菌種才能養(yǎng)好蛋白vs91化學(xué)工業(yè)儀器網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2021-01-26  來源:儀器網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):71
核心提示:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。



MEM是由Eagle s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。


Corning 10-010-CVR MEM培養(yǎng)基

DMEM

BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。


Corning 10-013-CVR DMEM高糖培養(yǎng)基,含丙酮酸鈉

aMEM

aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞。

 

Corning 10-022-CVR Alpha MEM(aMEM)培養(yǎng)基

Ham s F12

Ham s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。

RPMI 1640

RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。


Corning 10-040-CVR RPMI 1640培養(yǎng)基

干粉培養(yǎng)基

以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調(diào)pH值,過濾,過程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差,而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會(huì)減少,因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的,批間差會(huì)很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多,以前是這樣,但現(xiàn)在非也。 

 

Corning R50-020-PB RPMI 1640培養(yǎng)基 干粉

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無血清培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細(xì)胞培養(yǎng)中不需要添加血清,但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長(zhǎng)因子、必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細(xì)胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是的,從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當(dāng)。處于發(fā)育的不同分化階段的細(xì)胞(例如干細(xì)胞與定向前體細(xì)胞相比)需要不同的配方,對(duì)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時(shí),也去除了一些血清蛋白具有的保護(hù)、解毒作用,因此對(duì)試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價(jià)格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。

如何選擇培養(yǎng)基

經(jīng)常聽到有人問,這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問題的答案可以很簡(jiǎn)單,也可以好復(fù)雜。為什么這樣說呢?如果這種細(xì)胞是購(gòu)自一些細(xì)胞庫(kù),那很簡(jiǎn)單,問供應(yīng)商就行了。或者找到相關(guān)的文獻(xiàn),作為參考。

 

培養(yǎng)基這么多種,要選擇起來也是個(gè)頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的,或者是專門針對(duì)某一種細(xì)胞的,如昆蟲基本培養(yǎng)基(Corning 13-200-CVR)和神經(jīng)祖細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(Corning 40-400-CVR), 但是大部分液體培養(yǎng)基都是配方的,也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻(xiàn)、讓供應(yīng)商推薦,然后用自己的細(xì)胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出zui合適的培養(yǎng)基。畢竟實(shí)踐出真知。

 

怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品?

首先,當(dāng)然需要找對(duì)品牌,其次是找對(duì)自己所在區(qū)域的品牌代理商,針對(duì)自己所養(yǎng)的細(xì)胞,咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。

 

 

ACHN人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

RKO人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

SW480人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

 

SW598人結(jié)腸癌細(xì)胞

A-673 人橫紋肌瘤細(xì)胞

NTERA-2人畸胎瘤細(xì)胞

C-33 A人子宮頸癌

Calu-3人肺腺癌 (胸水)

ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌(zui低耐藥)

BIU-87人膀胱癌細(xì)胞

H295R人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞

H157人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞

H1264人肺癌細(xì)胞

H1339人小細(xì)胞肺癌

LS180人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

HK-2人腎小管上皮細(xì)胞

Colo201人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞(半貼壁)

NS-3人胃癌細(xì)胞

HCC38人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

NG108-15小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞

BT-20人乳腺癌細(xì)胞

H209(懸浮)人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

DMS153(懸?。┤诵〖?xì)胞肺癌細(xì)胞

MNNG/HOS人骨肉瘤細(xì)胞

HCC1937 人乳腺癌細(xì)胞

EBTr (NBL-4)牛胚氣管細(xì)胞

EJ-1人膀胱癌

KSY-1卡波斯肉瘤細(xì)胞

5637人膀胱癌

U251 MG人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

U373MG人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SNB-19人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

KNS-89人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

B2-17人星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞

HuT 78 人T淋巴瘤細(xì)胞

H9人T淋巴瘤細(xì)胞

H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)

ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞

SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞

 

本公司由海外華僑和多名海歸博士組成的技術(shù)團(tuán)隊(duì),在基礎(chǔ)科研領(lǐng)域,我們致力于推出更多更新的工具細(xì)胞和通路細(xì)胞,讓細(xì)胞生物學(xué)研究更簡(jiǎn)便、;在生命健康領(lǐng)域,我們致力于各種PDX腫瘤模型動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研發(fā),致力于CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)與CAS9基因編輯技術(shù)的結(jié)合應(yīng)用,為人類在zui終戰(zhàn)勝腫瘤的征途提供一份熱量和期許。

       我們的愿景:鞏固子實(shí)在醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作上的優(yōu)勢(shì)地位,更好的服務(wù)廣大科研工作者。我們的宗旨:持續(xù)關(guān)注客戶需求,持續(xù)提高我們的能力,持續(xù)發(fā)揮實(shí)驗(yàn)助手的作用。我們的質(zhì)量方針:客戶的滿意是我們服務(wù)的金標(biāo)準(zhǔn)。

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