概念和原理

 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(TUNEL cell apoptosis assay)是一種靈敏度高、快速、簡便的細(xì)胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細(xì)胞或組織樣品，經(jīng)過生物素標(biāo)記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞。

 TUN EL( terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling)即末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測定法，也稱DNA斷裂的原位末端標(biāo)記法。

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，生物素( biotin)標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶的作用下，可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂的基因組DNA的3-OH末端，而生物素叉可與連接了辣根過氧化酶的鏈霉親和素( streptavidin-HRP)特異結(jié)合，在辣根過氧化酶底物二氨基聯(lián)苯胺(DAB)的存在下，會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的顏色反應(yīng)（深棕色），特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞，因而在普通顯微鏡下即可觀察和計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3 -OH形成，故正常細(xì)胞很少被染色。

科研和臨床應(yīng)用

檢測人婁和動(dòng)物肝臟、腦部、睪丸等組織的細(xì)胞凋亡；

了解細(xì)胞凋亡的機(jī)制，探索疾病發(fā)生機(jī)制與治療途徑。

標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸

懸浮生長的培養(yǎng)細(xì)胞的甩片、涂片、冰凍切片、常規(guī)石蠟切片：3-5張，樣本；

貼壁生長的培養(yǎng)細(xì)胞：無菌培養(yǎng)瓶密封常溫運(yùn)輸，2-3天內(nèi)到達(dá)；

組織塊：以10%的福爾馬林或4%的多聚甲醛固定。

客戶須知

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