BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒 100T 產(chǎn)品簡介

BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒zui經(jīng)典的一款產(chǎn)品詳細信息
BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒說明書
一、概述 
在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側，細胞發(fā)生凋亡zui早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側翻向外側，這一變化早于細胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DNA的片斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象。AnnexinV是一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此AnnexinV被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加，PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細胞區(qū)分開來。

二、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒的組份： 

Product code Description
556547 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I
Components:
556547a Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E
556547b Annexin V-FITC (51-65874X)
556547c Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E)

三、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒的操作步驟 ：
貼壁細胞需用0.25%的胰酶消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的胰酶消化時，注意必須徹底清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的胰酶消化收集后（注：胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰絲氨酸與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。

四、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒的保存：
4℃保存，兩個月內(nèi)可保持穩(wěn)定；避免反復凍融。

五、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒的注意事項 ：
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的zui后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首先進行Annexin V-FITC染色，zui短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Annexin V : FITC Apoptosis Detection Kit I產(chǎn)品介紹：
細胞凋亡是在胚胎發(fā)育或組織更新維護過程中的出現(xiàn)的一種正常生理過程。細胞凋亡程序有顯著的形態(tài)學特征，包括質(zhì)膜不對性和吸附性的喪失，細胞質(zhì)和細胞核的皺縮，DNA核小體分裂。質(zhì)膜溶解是zui早出現(xiàn)的特征。在凋亡細胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）會從磷脂雙層內(nèi)部轉移到外部，使PS暴露在細胞外環(huán)境中。 Annexin V是一個分子量為35-36 kDa的Ca2+依賴型磷脂結合蛋白質(zhì)，其對PS有高親和性，可以結合到暴露到質(zhì)膜外層的PS。Annexin V可以結合熒光染料，包括FITC。這種結合既保留了對PS的高親和性，同時可以作為靈敏探針，用流式細胞分析檢測鑒定正在凋亡的細胞。由于PS變化出現(xiàn)在細胞凋亡早期，F(xiàn)ITC Annexin V染色可以更早地鑒定出調(diào)亡細胞，比基于細胞核變化的檢測，例如DNA斷裂要早。
FITC標記的 Annexin V 染色先于細胞凋亡或細胞壞死過程中伴隨產(chǎn)生的細胞膜完整性喪失的出現(xiàn)。因此，利用FITC標記的Annexin V染色時通常結合活體染料如碘化丙啶（PI）或7-Amino-Actinomycin（7-AAD），方便研究者鑒定出早期凋亡細胞（PI陰性，F(xiàn)ITC Annexin V陽性）。具備完整細胞膜的活細胞可以阻止PI浸入，然而細胞膜壞死或破壞后就可以浸透PI。例如，活細胞檢測結果應該是FITC Annexin V 陰性和 PI 陰性；早期凋亡細胞是FITC Annexin V 陽性 and PI 陰性；晚期凋亡細胞或已死亡細胞是FITC Annexin V 陽性和 PI陽性。此檢測不能區(qū)分出經(jīng)歷過凋亡的死細胞和經(jīng)歷其它壞死途徑的死細胞，因為二者都會同時被FITC Annexin V 和 PI染色。然而，持續(xù)觀察細胞凋亡都會經(jīng)歷三個階段：FITC Annexin V 和 PI 都是陰性（活細胞或沒有明顯細胞凋亡）；Annexin V陽性 和 PI 陰性（凋亡早期，具有完整細胞膜）；FITC Annexin V and PI 都是陽性（凋亡晚期或死亡）。經(jīng)歷這三個階段的細胞表明是經(jīng)歷細胞凋亡過程。相反，單一觀察顯示細胞FITC Annexin V和 PI都是陽性不能反映出細胞是否經(jīng)歷凋亡過程。
Annexin V : FITC Apoptosis Detection Kit I產(chǎn)品組份：
Part A: 51-66121E, 10X Annexin V Binding Buffer, 50 ml
Part B: 51-65874X, FITC Annexin V , 0.5 ml (1 ea), Vol. per Test: 5 μl
Part C: 51-66211E, Propidium Iodide Staining Solution 2.0 ml (1 ea), Vol. per Test: 5 μl
重慶市華雅干細胞有限公司在倉庫備有BD Annexin V : FITC 細胞凋亡檢測試劑盒I現(xiàn)貨，咨詢！
以下是BD 556547細胞凋亡檢測試劑盒的相關產(chǎn)品：556526HU E2F-3 PURE MAB 0.1MG TFE31556532HU IKK ALP PURE MAB 0.1MG B78-1556534P53 PE SET 100TST556535HU BCL-2 PE SET 100TST556536BCL-2 PE SET 100TST556537MS BCL-2 PE SET 100TST556538HU RB PROTEIN FITC SET 100TST556541HU CASP 7 PURE MAB 0.1MG B94-1556547ANXN V FITC APOPTOSIS DTEC KIT I 100TST556552AC-IETD-AFC CASPASE-8 FLRGNC SBSTR 1MG556554AC-IETD-CHO CASPASE-8 INHB 1MG556560HU P16 FITC SET 100TST556561HU P16 PE SET 100TST556570ANXN V FITC APOPTOSIS DTEC KIT II 100TST556574AC-DEVD-AFC CASPASE-3 FLRGNC SBSTR 1MG556576HU CDC25C PURE MAB 0.1MG C2-2556577PERFORIN FITC SET 100TST556578HU FAS FC CHIMERIC FUSION PTEIN 0.1MG556581HU CASP 6 PURE MAB 0.1MG B93-4556596HU 14-3-3 PURE MAB 0.1MG C23-1556597HU DNA TOPO I PURE MAB 0.1MG C-21556598HU CYCLIN F PURE MAB 0.1MG B74-2556600HU CYCLIN A1 PURE MAB 0.1MG B88-2556601NF-ATC2 PURE MAB 0.1MG 4G6-G5556602NF-ATC1 PURE MAB 0.1MG 7A6556604MASH1 PURE MAB 0.1MG 24B72D11.1556607HU CD2 PURE MAB 0.1MG RPA-2.10556608HU CD2 NHP FITC MAB 50TST RPA-2.10556610HU CD3 EPSL PURE MAB 0.1MG SP34556611HU CD3 EPSL NHP FITC MAB 50TST SP34556612HU CD3 EPSL NHP PE MAB 50TST SP34556614HU CD4 PURE MAB 0.1MG M-T477556615HU CD4 NHP FITC MAB 50TST M-T477556616HU CD4 NHP PE MAB 50TST M-T477556617HU CD16 PURE MAB 0.1MG 3G8556618HU CD16 NHP FITC MAB 50TST 3G8556619HU CD16 NHP PE MAB 50TST 3G8556620HU CD28 PURE MAB 0.1MG CD28.2556621HU CD28 NHP FITC MAB 50TST CD28.2556622HU CD28 NHP PE MAB 50TST CD28.2556624HU CD40 NHP FITC MAB 50TST 5C3556625HU CD45RA PURE MAB 0.1MG 5H9556626HU CD45RA NHP FITC MAB 50TST 5H9556627HU CD45RA NHP PE MAB 50TST 5H9556631HU CD20 PURE MAB 0.1MG 2H7556632HU CD20 NHP FITC MAB 50TST 2H7556633HU CD20 NHP PE MAB 50TST 2H7556634HU CD49D PURE MAB 0.1MG 9F10556635HU CD49D NHP PE MAB 50TST 9F10556640HU CD95 NHP FITC MAB 50TST DX2556641HU CD95 NHP PE MAB 50TST DX2556642HU HLA-DR PURE MAB 0.1MG G46-6556643HU HLA-DR NHP FITC MAB 50TST G46-6556644HU HLA-DR NHP PE MAB 50TST G46-6556647HU CD56 NHP PE MAB 50TST MY31556648MS IGG1 KPA ITCL PURE MAB 0.1MG MOPC-21556649MS IGG1 KPA ITCL NHP FITC 50TST MOPC-21556650MS IGG1 KPA ITCL NHP PE 50TST MOPC-21556651MS IGG2A KPA ITCL PURE 0.1MG G155-178556652MS IGG2A ITCL NHP FITC 50TST G155-178556653MS IGG2A KPA ITCL NHP PE 50TST G155-178556654MS IGG2B KPA ITCL PURE MAB 0.1MG 27-35556655MS IGG2B KPA ITCL NHP FITC 50TST 27-35556656MS IGG2B KPA ITCL NHP PE MAB 50TST 27-35