聯(lián)系我們時請說明是91化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝! 人冠狀動脈內(nèi)皮細胞產(chǎn)品說明。詳詢選購。 品牌：ScienCell 產(chǎn)地：美國 規(guī)格：5 x10^5，1ml，僅用于科研。不能用于臨床應(yīng)用。 【詳細說明】

產(chǎn)品編號:YB-H087

細胞名稱:人冠狀動脈內(nèi)皮細胞

規(guī)格:5×105cells/瓶

產(chǎn)品說明書:咨詢銷售人員

我司提供的人冠狀動脈內(nèi)皮細胞取自新鮮的組織，按照標準操作流程分離培養(yǎng)。研發(fā)的完全培養(yǎng)基(CM-H001)能提供細胞zui佳的生長條件，降低雜細胞污染，保證不同批次間細胞質(zhì)量的穩(wěn)定。

  同時，我司還建立了嚴格的細胞鑒定流程，所提供的原代細胞均需經(jīng)過細胞類型特異性標記物、細胞形態(tài)學(xué)等檢測，保證細胞純度在90%以上；同時也需經(jīng)過微生物檢測，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌。

購買細胞注意事項：

1.） 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。

2.）仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3.） 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)一夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4.） 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買培養(yǎng)基。

5.） 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。

6.） 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

操作步驟：

1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。

3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。

7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。

10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

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