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毓秀生物科技(上海)有限公司

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  毓秀生物科技(上海)有限公司坐落于全國(guó)的科技、貿(mào)易、信息、金融和航運(yùn)中心 上海。主要經(jīng)營(yíng)范圍為生物技術(shù)的研究及推廣等。主要有免疫組化,病理組織包埋染色,病毒包裝,熒光定量Q-PCR檢測(cè),人源化抗體,載體構(gòu)建,熒光原位雜交技術(shù)fish檢測(cè),ELISA檢測(cè),免疫熒光,CRISPR cas9 基因編輯等產(chǎn)品提供。 
  慢病毒包裝原理  慢病毒表達(dá)質(zhì)粒包含了包裝、感染、穩(wěn)定整合宿主細(xì)胞基因組所需的遺傳信息,包裝輔助質(zhì)粒則提供了所有的轉(zhuǎn)錄、包裝和重組假病毒所需要的輔助蛋白。為產(chǎn)出高滴度的病毒顆粒,通常將表達(dá)質(zhì)粒和包裝質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染至包裝細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝。包裝好的假病毒顆粒分泌到細(xì)胞外培養(yǎng)液中。通過收集含病毒顆粒的上清,進(jìn)行濃縮和純化可獲得高純度和高滴度的慢病毒。  慢病毒包裝步驟  1、轉(zhuǎn)染前1天,將293T細(xì)胞接種于10 CM培養(yǎng)皿中,加入15 mL含10%FBS的DMEM培養(yǎng)液,置37℃,5%CO2培養(yǎng)至約70-80%融合時(shí),進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。  2、轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞    (1)將慢病毒表達(dá)質(zhì)粒和包裝質(zhì)粒加入到Opti-MEM中,混勻。   (2)將適量的Lipofectamine 2000 (invitrogen)加入到Opti-MEM中,混勻。  (3)5分鐘后,將... [詳細(xì)介紹]
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