epG2.2.15細(xì)胞/ HepG2.2.15表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞 培養(yǎng)步驟

產(chǎn)品名稱：HepG2.2.15細(xì)胞

中文名稱：表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞；HepG2.2.15

規(guī)格：T25

形態(tài)特征：

生長(zhǎng)狀態(tài)：

特征特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件：MEM+480ug/mlG418+10%FBS（推薦HAKATA優(yōu)等胎牛血清貨號(hào)：HN-FBS-500）

傳代方法：1:3～1:6傳代，每周換液2～3次

凍存條件：HAKATA 無血清細(xì)胞凍存液 貨號(hào)：H-W-100 規(guī)格：100ML

支原體檢測(cè)：陰性

使用權(quán)限：A類

參考文獻(xiàn)：Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，11；D13S317：9，13；D16S539：12，13；D18S51：13，14；D19S433：15.2；D21S11：29，31；D2S1338：19，20；D3S1358：15，16；D5S818：11，12；D7S820：10；D8S1179：15，16；FGA：22，25；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：17；

供應(yīng)商：上?；鄯f生物科技有限公司

復(fù)蘇周期：10個(gè)工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

慧穎生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司，擁有獨(dú)立細(xì)胞房（可隨時(shí)約定參觀），供應(yīng)胎牛血清，無血清細(xì)胞凍存液，無血清培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)基，胰酶，雙抗，完全培養(yǎng)基，STR鑒定細(xì)胞，感受態(tài)細(xì)胞等，專業(yè)，專注，性價(jià)比高，是您Shou選之家。

熱賣細(xì)胞：

貨號(hào)  簡(jiǎn)稱  中文名稱  培養(yǎng)條件  特性  形態(tài)

H001  HeLa  人宮頸癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H002  143B  人骨肉瘤細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H003  293T  人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H004  A2780  人卵巢癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H005  A549  人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H006  A673  人尤因肉瘤細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  多邊形

H007  AGS 人胃腺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H008  BGC823  人胃腺癌細(xì)胞(低分化)  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H009  C33A  人宮頸癌細(xì)胞   DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H010  CACO2  人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞  DMEM+20% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H011  COLO205 人結(jié)腸癌細(xì)胞   RPMI-1640+10% FBS  半懸浮  上皮細(xì)胞樣

H012  DU145  人前列腺癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H013  ES-2  人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞   McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H014  H1650  人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H015  H460  人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞   RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H016  HACAT  人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞  DMEM+15% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H017  HCT116  人結(jié)腸癌細(xì)胞  McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H018  HEK293  人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H019  HEPG2  人肝癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H020  HGC27  人胃癌細(xì)胞(未分化)  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H021  HT-29  人結(jié)腸癌細(xì)胞   McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H022  HUVEC  人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞  ECM 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H023  KYSE150 人食道癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H024  L02(HL7702)(QSG-7701)  人正常肝細(xì)胞    RPMI-1640+20% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H025  LOVO  人結(jié)腸癌細(xì)胞   F12K+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H026  MCF-10A 人正常乳腺上皮細(xì)胞  DMEM/F12(1:1) 培養(yǎng)基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長(zhǎng)因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H027  MCF7  人乳腺癌細(xì)胞   DMEM+10% FBS+10 g/ml 胰島素  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H028  LX-2  人肝星狀細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H029  MDA-MB-468  人乳腺癌細(xì)胞  L-15+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H030  MIA Paca2  人胰腺癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣 少量圓形懸浮

H031  NCI-H1299  人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H032  PANC-1  人胰腺癌細(xì)胞   DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H033  RBE 人肝膽管癌細(xì)胞 DMEM+10%FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H034  SAOS-2  人成骨肉瘤細(xì)胞 McCoy s 5A+15%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H035  SiHa  人子宮頸鱗癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H036  NB 4  急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  圓形

H037  SPC-A-1 人肺腺癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H038  SW480  人結(jié)腸癌細(xì)胞   L-15+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H039  U-87MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H040  ZR-75-1 人乳腺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H041  SW1116  人結(jié)腸腺癌細(xì)胞  L-15+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H042  293A  人胚腎細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H043  SGC-7901  人胃腺癌細(xì)胞  RPMI-1640 +10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H044  Ishikawa  人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H045  Eca-109 人食管癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H046  RD-ES  人尤文氏肉瘤  RPMI-1640+15% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H047  NCI-H1437  人肺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H048  HOS   人骨肉瘤細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H049  Hela S3 人宮頸癌細(xì)胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H050  ECC1   人宮頸內(nèi)膜腺癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H051  SUP-B15   人Ph+急淋白血病細(xì)胞系  IMDM+20% FBS  懸浮  淋巴母細(xì)胞樣

H052  TF-1   人血液白血病細(xì)胞  RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF  懸浮  淋巴母細(xì)胞樣

H053  NCI-H446  人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H054  GES-1  人胃正常黏膜上皮細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H055  IOSE80 人卵巢正常上皮細(xì)胞株  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H056  GIST882 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H057  KGN 人卵巢顆粒細(xì)胞癌  DMEM/F12(1:1)+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H058  U937  人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  RPMI-1640 +10% FBS  懸浮  單核細(xì)胞樣

H059  SV-HUC-1  人膀胱上皮永生化細(xì)胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H060  tpc-1  人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xì)胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H061  hela-luci  Luciferase穩(wěn)定表達(dá)Hela細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H062  colo320 人結(jié)腸癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  半懸浮  圓形

H063  bxpc-3  人胰腺腺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H064  raji  人Burkitt s淋巴瘤細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  淋巴母細(xì)胞樣

H065  5637  人膀胱癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H066  chang-liver 人肝細(xì)胞(已被hela污染）  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H067  a549-gfp  gfp標(biāo)記的A549細(xì)胞  F12K+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H068  hs578.t 人乳腺癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS+10 g/ml 胰島素  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H069  T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞  McCoy s 5A+15%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H070  K562  人慢性髓系白血病細(xì)胞  IMDM+10% FBS  懸浮  淋巴母細(xì)胞樣

H071  EH-GB1  人膽囊癌細(xì)胞（表達(dá)GFP和RED2）  DMEM+15% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H072  skov-3  人卵巢腺癌細(xì)胞  McCoy s 5A+15%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H073  ECV304  人膀胱癌細(xì)胞（T24衍生物）  M199+20%FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H074  nci-n87 人胃癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H075  B-CPAP  人甲狀腺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H076  NCI-H1975  人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H077  HK-2  人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞  DMEM/F12(1:1)+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H078  J82 人膀胱癌細(xì)胞  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H079  A431  人皮膚鱗癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H080  MG63  人骨肉瘤細(xì)胞  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H081  SW48  人結(jié)腸癌細(xì)胞   DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H082  ME180  人宮頸表皮樣癌  McCoy s 5A+10%FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H083  hepaRG-GFP  Gfp標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H084  BEAS-2B 人正常肺上皮細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H085  THP-1  ATCC：TIB-202  人髓系白血病單核細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  單核細(xì)胞樣

H086  PC9 人肺癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H087  Fadu  人咽鱗癌細(xì)胞  DMEM(L)+10% FBS 貼壁  上皮細(xì)胞樣

H088  Huh7  人肝癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H089  Hcc9810 人肝癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H090  Jurkat cloneE6-1  人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  淋巴母細(xì)胞樣

H091  KBM-7  人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞  IMDM+10% FBS  懸浮  圓形

H092  GBC-SD  人膽囊癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H093  JEKO-1  人套細(xì)胞淋巴癌細(xì)胞  RPMI-1640+20% FBS  懸浮  圓形

H094  CAL27  人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H095  DB  彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  懸浮  淋巴母細(xì)胞樣

H096  hne1-lmp1  轉(zhuǎn)入LMP1基因人鼻咽癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H097  nci-h226  人肺鱗癌細(xì)胞  RPMI-1640+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

H098  hepg2.2.15  人肝癌細(xì)胞  DMEM+10% FBS  貼壁  上皮細(xì)胞樣

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