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SW116-LUC人大腸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記_LUC(熒光素酶)標(biāo)記細(xì)胞-上海美軒生物科技有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來(lái)源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):737
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SW116-LUC人大腸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記?操作步驟如下:
請(qǐng)收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn),用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格參照無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二) (二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn),即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注:1、觀察細(xì)胞建議在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否 則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們。

 
 
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