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 上海素冉生物科技有限公司是一批由美國(guó)留學(xué)歸來(lái)的致力于服務(wù)中國(guó)生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來(lái)，以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù)，贏得生物界老師的厚愛(ài)，您選擇素冉的理由： 產(chǎn)品齊全：囊括實(shí)驗(yàn)室儀器、設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動(dòng)物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全：囊括國(guó)內(nèi)外100多個(gè)知名品牌。 方便、快捷，訂貨周期短，選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞，全稱跟蹤，及時(shí)到達(dá)您的手中。素冉生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價(jià)：同等質(zhì)量的產(chǎn)品，我們這里價(jià)格實(shí)惠，為您節(jié)省每一分錢。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù)：實(shí)驗(yàn)過(guò)程，我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo)，若有問(wèn)題，我們第一時(shí)間為您處理，保證您售后無(wú)憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù)：免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)等。 總之，素冉生物是您值得信賴的地方：誠(chéng)實(shí)正直，以客戶的切身利益為出發(fā)點(diǎn)，關(guān)注客戶，協(xié)助客戶一起成長(zhǎng)！

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細(xì)胞名稱 上海中科院細(xì)胞庫(kù) ATCC細(xì)胞庫(kù)|HT-1080細(xì)胞

HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞|HT-1080細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性 上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格 1 10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件 MEM+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)條件 氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

背景資料 最初認(rèn)為這個(gè)細(xì)胞源自喉上皮癌，但隨后通過(guò)同功酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn)，起源細(xì)胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。

HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞|HT-1080細(xì)胞常規(guī)說(shuō)明：

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液

細(xì)胞質(zhì)檢情況：不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請(qǐng)務(wù)必重視。

一、 細(xì)胞復(fù)蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來(lái)，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動(dòng)。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來(lái)噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺(tái)里。

2. 把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來(lái)），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來(lái)。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動(dòng)，使培養(yǎng)皿中的細(xì)胞均勻分布。

4. 標(biāo)好細(xì)胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。

5. 3天換一次培養(yǎng)基。

二、HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞

1. 培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。

2. 把原有培養(yǎng)基吸掉。

3. 加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細(xì)胞就行），消化1-2分鐘。

4. 細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5. 用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來(lái)。

6. 把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來(lái)。

8. 根據(jù)細(xì)胞種類把細(xì)胞傳到幾個(gè)培養(yǎng)皿中。一般，癌細(xì)胞分5個(gè)，正常細(xì)胞傳3個(gè)。繼續(xù)培養(yǎng)。

三、HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞凍存

把細(xì)胞消化下來(lái)并離心（同上）。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來(lái)，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細(xì)胞種類，凍存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃過(guò)夜，然后放到液氮灌中保存。

凍存液的配制： 70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

要注意的就是無(wú)菌操作！

上海中科院細(xì)胞庫(kù) ATCC細(xì)胞庫(kù)|HT-1080細(xì)胞

HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞脂肪細(xì)胞在能量?jī)?chǔ)存和代謝過(guò)程中有著重要的作用。
脂肪細(xì)胞分化是一個(gè)發(fā)展的過(guò)程，它對(duì)代謝穩(wěn)態(tài)和營(yíng)養(yǎng)信號(hào)很重要。
它由復(fù)雜的過(guò)程控制，如基因表達(dá)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。
前脂肪細(xì)胞存在于成人脂肪組織中，能根據(jù)能量的平衡增殖和分化成熟的脂肪細(xì)胞。
前體細(xì)胞的增殖和分化能夠增加脂肪組織的體積。
在體外培養(yǎng)中，不同的組織來(lái)源前脂肪細(xì)胞的油脂含量，成脂轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)和TNFalpha誘導(dǎo)的凋亡均有不同。
同時(shí)研究表明它還與脂肪分化以及許多生理病理過(guò)程密切相關(guān)，如脂肪代謝、能量平衡、肥胖、糖尿病、高血脂和乳癌。

HS683 人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞） 7210 人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟提取于內(nèi)臟脂肪組織， 7200 人脂肪細(xì)胞-皮下提取于人皮下脂肪組織，*代凍存，每管含有細(xì)胞數(shù) 1 106 cells/ml，此細(xì)胞通過(guò)CD44, CD90免疫熒光染色和脂肪染色驗(yàn)證，經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。 

推薦培養(yǎng)基:（PAM, Cat. No. 7211）
其他產(chǎn)品信息：

NDB0385-100ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 100ml
NDB0385-500ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 500ml
NE109-100ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 100ml
NE109-500ml Nonidet P-40 （NP-40） 諾納德 P-40 [9016-45-9] 500ml
N6250-100g Norfloxacin 諾氟沙星 [70458-96-7] 100g
N2858-25g DL-Norvaline DL-正纈氨酸 [760-78-1] 25g

細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

問(wèn)題

原因

解決方案

細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢

生長(zhǎng)培養(yǎng)基使用不當(dāng)

按照生產(chǎn)商的建議，使用相應(yīng)的預(yù)熱生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差

使用其他批次血清。

傳代操作不當(dāng)

按照生產(chǎn)商的建議消化時(shí)間及傳代比例進(jìn)行操作。

換液過(guò)于頻繁

降低換液頻率，參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。

細(xì)胞傳代次數(shù)過(guò)多

使用傳代次數(shù)較少的健康細(xì)胞。

細(xì)胞生長(zhǎng)超過(guò)匯合狀態(tài)

哺乳動(dòng)物細(xì)胞傳代應(yīng)在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)進(jìn)行，建議細(xì)胞密度達(dá) 80-90%傳代。

細(xì)胞被支原體污染

將細(xì)胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄；新取一只凍存細(xì)胞，并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。

細(xì)胞復(fù)蘇存活率低

細(xì)胞凍存不當(dāng)

新取一只凍存細(xì)胞，并儲(chǔ)存在液氮中。將細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中，直至復(fù)蘇。

自行制備的凍存細(xì)胞無(wú)活性

將細(xì)胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。

制備凍存細(xì)胞時(shí)使用傳代次數(shù)少的細(xì)胞。

嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細(xì)胞。請(qǐng)注意本手冊(cè)推薦的冷凍程序是凍存細(xì)胞的一般流程，只能作為指導(dǎo)原則使用。

新取一只凍存細(xì)胞。

細(xì)胞復(fù)蘇方法不當(dāng)

嚴(yán)格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復(fù)蘇細(xì)胞。請(qǐng)注意本手冊(cè)推薦的解凍程序是復(fù)蘇細(xì)胞的一般流程，只能作為指導(dǎo)原則使用。

確保冷凍細(xì)胞解凍迅速，接種前用預(yù)熱的生長(zhǎng)培養(yǎng)基緩慢稀釋細(xì)胞。

復(fù)蘇培養(yǎng)基使用不當(dāng)

使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預(yù)熱。

細(xì)胞稀釋過(guò)度

按照生產(chǎn)商的建議，將解凍后的細(xì)胞高密度接種，以改善復(fù)蘇效果。

處理細(xì)胞時(shí)動(dòng)作不夠輕柔

凍存和復(fù)蘇過(guò)程對(duì)大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)造成不利影 響。不要通過(guò)渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細(xì)胞脫落(培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞時(shí)除外)，也不要高速離心細(xì)胞。

凍存液中所用保護(hù)劑在儲(chǔ)存過(guò)程中未避光

如果未避光儲(chǔ)存，凍存保護(hù)劑會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)閷?duì)細(xì)胞有毒性的物質(zhì)；新取一只凍存保護(hù)劑，重新凍存細(xì)胞。

 ★由于細(xì)胞庫(kù)現(xiàn)有細(xì)胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯(cuò)誤，需要了解相關(guān)細(xì)胞價(jià)格及詳細(xì)資料直接call，對(duì)您造成的不便還請(qǐng)見(jiàn)諒！
 ★注：如運(yùn)輸過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無(wú)條件補(bǔ)發(fā)
       收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問(wèn)題提供照片可半價(jià)重發(fā)
最后，通過(guò)低溫保藏儲(chǔ)備一些細(xì)胞，以防支原體大面積來(lái)襲。如果支原體有抬頭的跡象，或常規(guī)檢測(cè)呈陽(yáng)性結(jié)果，那么最可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺(tái)，一切從頭開(kāi)始。當(dāng)然，你得確保儲(chǔ)備的細(xì)胞是不含支原體的。