GIBICO DMEM ,10% 胎牛血清，很好養(yǎng)，長的很快，細胞形態(tài)：在密度低的時候，是多邊形，密度大的時候，偏向于梭形。

1. 細胞核材料：冷藏保存的人肝細胞（M/F0095-P），InViteoGro CP 培養(yǎng)基（Z990003）,和InViteoGro HI培養(yǎng)基（Z990012）從試管內(nèi)技術(shù)（Baltimore,MD）獲得。

C2-神經(jīng)酰胺、C2-二氫神經(jīng)酰胺和C6-神經(jīng)酰胺是從Alabaster,AL獲得的?？笻uR抗體是從Santa Cruz,CA 獲得的， 肌動蛋白是從Cambridge,MA買來的。

HRP共軛的抗兔和鼠的IgM來自Hercules,CA。ECL Western blot 探測箱來自GE 醫(yī)療保健（Salt Lake City,UT）。FuGENE6轉(zhuǎn)染試劑來自Roche(Indianapolis,IN)，Maxiprep盒來自Qiagen(Santa Clarita,CA)。

Pan-caspase 抑制器Zvad-fmk和Caspase抑制器設備分別購買于Axxora(San Diego ,CA)和Calbiochern(La Jolla,CA)。Caspase5分析儀來自Calbiochern，caspase5cDNA來自OriGene(Rockville,MD)。

2.用低氧處理肝細胞：冷藏的人肝細胞移出和溶解在InVitroGro CP培養(yǎng)基中。細胞在CP培養(yǎng)基稀釋到濃度為0.7 106cells/ml。

肝細胞像膠原一樣涂抹在玻片上，然后放置在37℃、5%CO2的培養(yǎng)器里。經(jīng)過了一夜的培養(yǎng)，肝細胞轉(zhuǎn)移到InVitroGro HI 培養(yǎng)基中。

肝細胞在HI培養(yǎng)基中培養(yǎng)一夜后，玻片放置在一個缺氧的容器(Billups-Rothenberg)里，充滿了95%的氮氣和5%的二氧化碳，在37℃培養(yǎng)12-72和小時。

氧氣的濃度用YSI模型55CE溶解的氧探針(YSI,Marion,MA)測量。用于這些研究中，缺氧的條件是氧氣的濃度在0.09 0.001mg/l。

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