歡迎大家訂閱電轉(zhuǎn)染小課堂，本期我們來(lái)分享如何選擇電穿孔的波形，各波形需要設(shè)置的參數(shù)有哪些？以及兩種波形之間的轉(zhuǎn)換

Part 1 方波

方波脈沖是指電壓瞬間升至預(yù)設(shè)電壓，保持電壓放電，然后瞬間終止放電。一般哺乳動(dòng)物細(xì)胞電轉(zhuǎn)染時(shí)選擇方波脈沖，有較高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率。選擇方波時(shí)，有以下參數(shù)要進(jìn)行考慮：場(chǎng)強(qiáng)、脈沖長(zhǎng)度、脈沖個(gè)數(shù)以及脈沖間隔。

方波-主要用于電轉(zhuǎn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織，也可用于細(xì)胞融合

場(chǎng)強(qiáng)：兩電極間的電壓大小，用Kv/cm表示，場(chǎng)強(qiáng)改變一般通過(guò)調(diào)整脈沖電壓或電極間距來(lái)實(shí)現(xiàn)。

    脈沖長(zhǎng)度：?jiǎn)蝹€(gè)脈沖持續(xù)的時(shí)間，脈沖長(zhǎng)度與細(xì)胞膜穿孔保持開(kāi)放的時(shí)間緊密相關(guān)，如時(shí)間太長(zhǎng)則導(dǎo)致孔徑無(wú)法恢復(fù)；如時(shí)間太短則外源物質(zhì)無(wú)法通過(guò)細(xì)胞膜。 

脈沖個(gè)數(shù)和間隔：是指脈沖的個(gè)數(shù)以及每?jī)蓚€(gè)脈沖之間的間隔。有時(shí)為達(dá)到優(yōu)化的分子傳遞效果，我們可以采用多脈沖。

Part 2 指數(shù)衰減波

指數(shù)遞減波脈沖是先對(duì)電容充電，然后讓電容完全放電，其電壓變化呈指數(shù)遞減。一般這種波形的脈沖電轉(zhuǎn)染適用于細(xì)菌、酵母菌、昆蟲(chóng)細(xì)胞。選擇指數(shù)衰減波時(shí)，有以下參數(shù)要進(jìn)行考慮：場(chǎng)強(qiáng)、電容、電阻、時(shí)間常數(shù)。

指數(shù)衰減波-主要用于電轉(zhuǎn)細(xì)菌，酵母，植物（有細(xì)胞壁的細(xì)胞），有時(shí)候?qū)σ恍┎溉閯?dòng)物細(xì)胞也適用

場(chǎng)強(qiáng)：同方波。

電容：容納電場(chǎng)的能力，用uF表示，釋放能量的大小可通過(guò)調(diào)節(jié)電阻來(lái)實(shí)現(xiàn)。一般我們采用高電壓，低電容或低電壓，高電容。

時(shí)間常數(shù)：指數(shù)衰減波的脈沖長(zhǎng)度，用RC表示，為電阻與電容的乘積。指數(shù)衰減波時(shí)間常數(shù)越大，衰減的越慢，反之則越快。

電阻：阻礙電流的能力，有時(shí)又內(nèi)部電阻和外部電阻之分，如BTX電路則是內(nèi)部樣品電阻與外部設(shè)置電阻進(jìn)行并聯(lián)，通過(guò)調(diào)整外部電阻進(jìn)而來(lái)調(diào)節(jié)總電阻，進(jìn)而調(diào)節(jié)脈沖時(shí)間。

Part 3 方波與指數(shù)衰減波之間如何轉(zhuǎn)換？

如果你查閱文獻(xiàn)，只發(fā)現(xiàn)有指數(shù)衰減波的參數(shù)，而你想嘗試方波，那怎么辦呢？接下來(lái)讓我們看看這兩種波形如何轉(zhuǎn)換吧。

從指數(shù)衰減波轉(zhuǎn)換為方波：保持電壓/電極間隙/脈沖時(shí)間/脈沖間隔不變；

無(wú)需設(shè)置電容和電阻參數(shù)

脈沖長(zhǎng)度為指數(shù)衰減波時(shí)間常數(shù)的一半

從方波轉(zhuǎn)換為指數(shù)衰減波：保持電壓/電極間隙不變

通過(guò)調(diào)整電阻和電容使時(shí)間常數(shù)為方波脈沖長(zhǎng)度的2倍，

注意：這些轉(zhuǎn)換都是理論上的，通常方波對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞更有效，指數(shù)衰減波對(duì)細(xì)菌/酵母更有效。

下期預(yù)告：電轉(zhuǎn)染小課堂之如何選擇緩沖液？

    自從1938年BTX推出商用電穿孔儀以來(lái)，BTX一直處于電穿孔技術(shù)的最前沿，一直致力于為各種細(xì)胞和組織類型提供完整的轉(zhuǎn)染解決方案，包括真核生物，原核生物，體內(nèi)組織，卵內(nèi)，子宮內(nèi)，貼壁和懸浮培養(yǎng)，植物細(xì)胞，皮膚和肌肉免疫。除電穿孔儀外，BTX還為各種應(yīng)用提供和研發(fā)專業(yè)的電極。北京德泉興業(yè)商貿(mào)有限公司為BTX在北京和東三省地區(qū)的一級(jí)代理。歡迎致電聯(lián)系我們。