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BI教您如何做好細胞凍存與復蘇——中國生物器材網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-08-14  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):278
再滿血復活?
逍鵬生物的老司機為此做了總結(jié)。。。。
 選 好 細 胞 凍 存 液 是 基 礎(chǔ)

使用動物血清常常會遇到很多問題,例如:病毒感染、其他動物源的污染。使用無血清制品培養(yǎng)與凍存細胞,可以消除這方面的隱患。此外,無血清凍存液可以確保細胞在化學成分固定的條件下生長,更進一步確保細胞凍存時的條件穩(wěn)定

慢 慢 做 冷 凍

若您養(yǎng)的是貼壁細胞,請先將細胞消化下來;若是懸浮細胞,請直接按以下步驟進行:
1. 以200-300g離心3分鐘,棄去上清,收集細胞。
2. 用BI無血清凍存液將細胞重懸(不需回溫),將細胞密度調(diào)整為3~5x106 cells/ml,添加到凍存管中(一般每管1ml)。
3. 建議將含有細胞懸液的凍存管放進漸進降溫盒或是保溫杯中,置于-80 C冰箱6小時以上或是過夜(或不需要程序降溫)。
4. 將凍存管迅速移到液態(tài)氮中保存。
5. 凍存24小時后,建議檢測細胞存活率。

 迅 速 做 復 蘇

1. 將細胞凍存管由液態(tài)氮中取出,置于室溫回溫,不用水浴溶解。此時可準備新鮮培養(yǎng)基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。
2. 在生物安全柜內(nèi),直接以少量培養(yǎng)基反復沖融,使細胞團塊化凍。
3. 先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。
4. 倒去上清液,重懸細胞,移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

 hESC were frozen in CryoStem and were thawed  into NutriStem hESC XF Medium
(H1 hESC BGO1V/hOG cells)

1 hour post-thawing

Day 1 Post-thawing

Day 4 Post-thawing
yoyo~~ BI 凍 存 液 來 一 套
不含動物成份
細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過90%


Serum-Free Cell Freezing Medium
無血清細胞凍存液,貨號: 05-065-1A/B
無血清培養(yǎng)的細胞應該使用無血清的凍存液保存,以保持無血清培養(yǎng)體系的完整。本凍存液不含蛋白及動物組分,主要成分為DMSO和甲基纖維素。
Cryostem ACF Freezing Media
無血清干細胞凍存液(Optimized for Stem Cell),貨號: 05-710-1B/E
CryoStem對所有種類的細胞都有非常好的凍存效果,該產(chǎn)品經(jīng)過驗證,特別適用于人胚胎干細胞和人原代細胞的凍存。用CryoStem凍存融解后,細胞表現(xiàn)出極佳的復蘇率、生長活性、貼壁性和傳代能力。
MSC Freezing Medium
無血清間充質(zhì)干細胞凍存液,貨號: 05-712-1B/E
即用型溶液,特別適用于人類間充質(zhì)干細胞凍存,用MSC凍存液凍存融解后,細胞表現(xiàn)出極佳的復蘇率、生長活性。

關(guān)于 細胞凍存和復蘇
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產(chǎn)品咨詢:021-58785545-8006, 18917190011
技術(shù)支持:400-820-3979

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