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​大鼠ELISA試劑盒通用操作說明——中國生物器材網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-07-16  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):467
每一次提醒你總能默默地記住,每一項任務你都會靜靜地完成,對自己及時反省讓你慢慢地進步,望你帶著這些好的品質(zhì)去新的天地開拓,一定會有豐厚的收獲。小編為大家介紹 大鼠ELISA試劑盒操作說明 。
操作步驟:   1.   標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100 l,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50 l,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100 l分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50 l,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50 l棄掉,再各取50 l分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50 l分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50 l,混勻后從第七、第八孔中分別取50 l加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50 l,混勻后從第九第十孔中各取50 l棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50 l,濃度分別為24ng/L,16ng/L ,8ng/L,4ng/L, 2ng/L)。   2.   加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 l,然后再加待測樣品10 l(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。   3.   溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   4.   配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。   5.   洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。   6.   加酶:每孔加入酶標試劑50 l,空白孔除外。   7.   溫育:操作同3。   8.   洗滌:操作同5。   9.   顯色:每孔先加入顯色劑A50 l,再加入顯色劑B50 l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.   10. 終止:每孔加終止液50 l,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。   11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
 
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