人胃泌素 (Gastrin)ELISA 試劑盒準備試劑與收集血樣
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入1ml 蒸餾水 混勻，配成 4 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 4 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二 管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
結(jié)果計算與判斷
1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計算。
2. 以標準品4000 、 20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 0 pg /ml 為橫坐標， OD 值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。
3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) Gastrin 含量。
試劑盒性能
1. 靈敏度 ： *小的Gastrin 檢測濃度小于 30 pg/ml。
2. 特異性： 可同時檢測重組或天然的人 Gastrin 。 不與 人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。
3. 重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。
注意事項
1. 以上標準孔及待 測 樣品均建議做復孔，每次測定應(yīng)同時 做 標準曲線。
2. 洗滌過程 很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致精確度誤差及 OD 值錯誤地升高。
3. 板條開封后剩余板條要再封好，保持 板條干燥 。
4. 本試劑盒宜置 4 o C冰箱保存。
5. 本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！