倒置生物顯微鏡適合用來觀察細胞培養(yǎng)實驗

對于在上海光學儀器一廠倒置顯微鏡下的觀察來說，細胞培養(yǎng)容器
塑料制品優(yōu)于玻璃的。

玻璃的主要優(yōu)點是價格便宜，所以在常規(guī)維持培養(yǎng)時應當
認真考慮。不論塑料和價廉而硬度低的玻璃都不能重復使用。
 
  1.當?shù)沟羝績?nèi)液體的時候，應將培養(yǎng)瓶口在火焰上稍微
烤一下。在常規(guī)的操作中，作者只在倒掉液休后將瓶口火烤。
嚴格的技術要求在倒掉液體的前后都要進行火烤。

  2.自培養(yǎng)物倒出的液體，應當經(jīng)漏斗傾注入一個錐形瓶
中，隨后應將漏斗用1:10稀釋的漂白粉(Clorox)徹底清洗，
減少細胞間交叉污染的危險。

  3.已經(jīng)插入裝有細胞的瓶中的吸管，再不能插進貯存培
養(yǎng)基、鹽溶液或胰酶的瓶中。

  4.決不將一個入的細胞都在同一天傳代培養(yǎng)。剩下的細
抱至少保存48小時(如果可能的話)，然后再處理(傳代培養(yǎng)
或更換培養(yǎng)基)。小心地首先檢查傳代培養(yǎng)的細胞有無污染
的跡象(培養(yǎng)基混濁不清，異常的pH)

5.血清吸管在使用后，盡快地將每個吸管的棉花塞吹出，
然后倒過來放人浸液(1并7X)中。用過的吸管不應該任其
干涸。
6.使用你自己盛原液用的瓶子和盛吸管的吸管雄，決不
使用別人的。因為一旦污染發(fā)生，別人的或你自己的錯誤
操作，都可能對確定污染源造成困難。

7.當將裝有培養(yǎng)基的瓶子再放回冰箱中供以后使用時，
始終要保證將瓶帽塞緊，特別是對于C02緩沖荊。如果pH
變得太堿(鮮粉紅色—酚紅指示劑)，培養(yǎng)基須補充C02氣
體1分鐘、或直到培養(yǎng)基的顏色達到正常(橙紅色)。不要將
C02氣流直接通人含有胎牛血清的培養(yǎng)基中，否則將產(chǎn)生過
多的泡沫。

  8.為了節(jié)約，將舊培養(yǎng)瓶留著當作一個新培養(yǎng)瓶使用是
不明智的。這一方法的主要問題是:(1)有組織碎片或舊培
養(yǎng)基的堆積;(2)在傳代培養(yǎng)的過程中，細胞的分配不準確。

  9.就常規(guī)的細胞維持來說，至少應該建立2個新的培養(yǎng)
物，然后，在下一次傳代培養(yǎng)時，一個可以進行傳代而另一個
保留下來，以防發(fā)生污染或生長出現(xiàn)問題。.培養(yǎng)物在一分為
四以后，不一定4個都建立(2個就足夠)。通常，保存數(shù)個傳
代培養(yǎng)的老培養(yǎng)物時，在每個傳代瓶子背面都注上日期是明
智的。保存3個以上不同時期的傳代培養(yǎng)瓶子，通常是不必
要的，而且不能合理利用培養(yǎng)箱的空間。

  10.人的二倍體單層細抱，每周應該傳代培養(yǎng)或更換培養(yǎng)
基一次以上。它們?nèi)菰S一分為二或一分為四，習慣上不推薦
一分為八。

  11.當細胞是用作染色體研究的時候，推薦用75平方厘
米的瓶子，因為它們比它英兩容量的瓶子有較大的表面，在細
胞生長到匯合時，75平方厘米的培養(yǎng)瓶一般每瓶含有6-
7 X 106次方的細胞，而8英兩的瓶子約含2-3 X 106次細胞。

不可在玻璃和塑料容器之間來回來去接種細胞。

  12.在條例中未包括16英兩容量的瓶子。它們在容量上
和細胞增殖到匯合時的預期細胞數(shù)約相當于75厘米的錐形
瓶。因為它們不能架著放置，所以須占用較大的溫箱的空間

(本文由上海光學儀器廠編輯整理提供, 未經(jīng)允許禁止復制,轉載須注明網(wǎng)址http://www.sgaaa.com)