酶的制備實(shí)驗(yàn)-層析是純化酶時(shí)常要經(jīng)過(guò)的步驟

  制酶的實(shí)際操作方法與設(shè)備儀器一發(fā)生故障，即無(wú)法再繼續(xù)
操作。切記手續(xù)能簡(jiǎn)則簡(jiǎn)，別無(wú)他法時(shí)，再改用比較復(fù)雜的方法。
 
  基本設(shè)備、特殊材料與試劑  測(cè)定酶活性少不了一臺(tái)紫外可
見(jiàn)分光光度計(jì)，最好再聯(lián)上一臺(tái)記錄儀，用以記錄某段時(shí)間內(nèi)酶反
應(yīng)的過(guò)程。如果由于反應(yīng)量過(guò)少或其他原因，用分光光度計(jì)無(wú)法測(cè)
量或測(cè)不準(zhǔn)的時(shí)候，就要利用放射性同位素的高度靈敏性，在酶反
應(yīng)的過(guò)程中混入某種放射性同位素，再用閃爍計(jì)數(shù)器
  測(cè)出反應(yīng)的結(jié)果。
  酶的制備常免不了要離心分離。固然在工業(yè)上分離沉淀總是用
過(guò)濾的方法，但是在實(shí)驗(yàn)室里則以離心分離比較簡(jiǎn)便好用。離心分
離機(jī)以能使轉(zhuǎn)室溫度保持在0℃以下，轉(zhuǎn)速能達(dá)每分鐘二萬(wàn)轉(zhuǎn)者最常
用到，大小各式轉(zhuǎn)頭最好具備。
  柱層析是純化酶時(shí)常要經(jīng)過(guò)的步驟。雖然在實(shí)驗(yàn)室中用普通玻
璃管、滴定管、甚至注射器就可以制成層析柱，而分離出來(lái)的液體
也可以人工分部收集(Fraction—collecting)，再用分光光度計(jì)逐
個(gè)試管去測(cè)定活性。但是如果能有一套設(shè)備，其中包括幾支大小長(zhǎng)
短不同的層析柱，一臺(tái)自動(dòng)分部收集器(Fractioncollector)，并
配有一部紫外監(jiān)測(cè)儀(uvmonitor)，一臺(tái)蠕動(dòng)泵(Peristalticpump)
，和一具梯度混合器(Gradientmixer)，則使用起來(lái)極為方便省時(shí)
。這樣的一套設(shè)備所值和分光光度計(jì)相仿，現(xiàn)以瑞典Pharmacia—L
KB公司的出品最為人所樂(lè)用。
  因?yàn)橛缮矬w中提取酶要先將細(xì)胞破壞，所．以攪碎器(Blend
er)和勻漿器(Homogenizer)都是酶實(shí)驗(yàn)室常要用到的工具。其他如
精密天平、復(fù)電極pH計(jì)、攪拌器、制冰機(jī)等也都是一般生物化學(xué)實(shí)
驗(yàn)室所必需有的設(shè)備

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