用相差顯微鏡檢查培養(yǎng)瓶，觀察細胞生長或形態(tài)

制備瓊脂平板
  1b．在電阻為10(或更高)的蒸餾水或去離子水中，依照生產(chǎn)商
提供的處方制備胰酶解酪蛋白大豆瓊脂、Sabouraud葡萄糖瓊脂和Y
M瓊脂。用一個至少兩倍于培養(yǎng)基的耐高壓容器盛放培養(yǎng)基(如用2L
錐形燒瓶Erlenmeyer盛lL培養(yǎng)基)，可避免高壓消毒過程中液體溢
出。在緩慢排氣或液體循環(huán)程序中，121℃高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基15r
ain。于近50℃水浴冷卻。無菌條件下，以50ral／L(5％)比例，將
去纖維蛋白羊血加入到胰酶解酪蛋白大豆瓊脂中。無菌條件下，在
lOOmmX 15mm一次性無菌塑料平皿中分裝培養(yǎng)基，24ml／111]．。1
0～20個平板疊放在…慈，室溫冷卻凝固，過夜。然后裝入有通氣
孔的塑料袋內(nèi)，4～8℃儲存，質(zhì)控檢查后備用(保質(zhì)期12周)。冷凍
安瓿的樣品制備：用1支lml血清學(xué)吸管從準備細胞冷凍的各個管中
取細胞懸液約5％，均勻混合。
細胞培養(yǎng)瓶：用低倍倒置顯微鏡，

最好是相差顯微鏡，逐一檢查培養(yǎng)瓶，觀察細胞生長或形態(tài)是否有
異常。無菌條件下從可疑污染的培養(yǎng)液中吸取5ml培養(yǎng)上清液做進
一步檢查測試。隔離可疑的培養(yǎng)物或器皿，確保它們不與潔凈物品
產(chǎn)生交叉污染。8．濕封待測的樣本，然后在油鏡(放大率≥1000×
)下檢查。9．如果培養(yǎng)液中含抗生素，在進行培養(yǎng)基微生物檢測之
前洗滌細胞。20009離心20min
  (室溫或4～8℃)，去掉上清液，用不含抗生素的培養(yǎng)基重懸沉淀
。如此步驟需重復(fù)
  3次，徹底清除微量的抗生素，以免干擾微生物培養(yǎng)。

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