液體培養(yǎng)基純度鑒定試驗(yàn)涂片鏡檢圖像顯微鏡
分離物純度鑒定試驗(yàn)
當(dāng)分離物經(jīng)涂片鏡檢,在形態(tài)上認(rèn)為純種后,還要進(jìn)一步作確
定性的培養(yǎng)物純度試驗(yàn)。
1.配制上述各種有氧和無氧培養(yǎng)基,分裝培養(yǎng)管,每管4.5m
L,滅菌備用。
2.將欲試驗(yàn)菌株的菌落轉(zhuǎn)接入相應(yīng)的產(chǎn)甲烷菌液體培養(yǎng)基中
,培養(yǎng)后作為菌種原液。
3.融化各種培養(yǎng)基,第一支應(yīng)為液體培養(yǎng)基,后2。5支為固
體培養(yǎng)基。按厭氧操作技術(shù)加入1%硫化鈉與5%碳酸氫鈉的混合液
0.1mL,在相應(yīng)處理中加入相應(yīng)基質(zhì),但在所有處理中都不加入青
霉素溶液。接入菌種原液,每管0.1mL,依次稀釋,每個(gè)處理
4.將各種培養(yǎng)基處理的滾管和液體培養(yǎng)基培養(yǎng)管分為兩組,
一組進(jìn)行好氧培養(yǎng),一組進(jìn)行厭氧培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為37℃。
5.如果所獲分離物是產(chǎn)甲烷菌純種,那么此分離物只能在基
礎(chǔ)固體培養(yǎng)基并含有基質(zhì)的厭氧培養(yǎng)中生長而形成菌落,在液體培
養(yǎng)中使培養(yǎng)液渾濁。如果還能在好氧和厭氧培養(yǎng)的其它培養(yǎng)基中生
長,則表示這些分離物不純,混有其它類型的微生物。
在有菌體生長和菌落形成的厭氧培養(yǎng)管中,鏡檢生長物形態(tài)、
大小特征是否與原接入菌種相同,并進(jìn)行產(chǎn)甲烷能力和熒光的檢測
。如果確是原接入的菌種,說明此分離物為產(chǎn)甲烷菌的純培養(yǎng)物
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