熒光顯微鏡下觀察細胞傷損實驗-顯微鏡測定技術(shù)

細胞損傷實驗熒光濾片，在熒光顯微鏡下觀察。
無論從生物學(xué)或?qū)嵱媚康牡慕嵌瘸霭l(fā)，研究細胞損傷需要一些方法
，來鑒別在細胞培養(yǎng)或組織內(nèi)常少數(shù)存在的受傷細胞。策略設(shè)計

根據(jù)用正常不能滲透的大分子示蹤劑標(biāo)記細胞質(zhì)的原理鑒別受傷細
胞。細胞膜破裂，示蹤劑進入細胞質(zhì)，然后破裂處封閉，示蹤劑位于細
胞內(nèi)。死細胞的細胞膜破裂后不能封閉，只要洗去全部外源性示蹤劑則
不被標(biāo)記。有幾種細胞損傷示蹤劑供選擇。熒光素標(biāo)記的右旋糖酐比較
便宜，不同分子質(zhì)量(5000～2 000 000)的右旋糖酐均可使用。如果使
用醛固定的標(biāo)本，須用結(jié)合有賴氨酸的右旋糖酐。

如果在顯微鏡測定或熒光測定方面可觀察到損傷示蹤劑，能夠鑒定
受傷細胞示蹤劑的優(yōu)點是已知加入和除去示蹤劑的時間，如熒光素標(biāo)記
的右旋糖酐。因此，可用于脈沖追蹤(pulse-chase)標(biāo)記方案，以便確
定細胞損傷時間的選擇。白蛋白是一種很好的細胞損傷示蹤劑。在動物
整體研究中，白蛋白的突出優(yōu)點是高濃度時許多組織的細胞外環(huán)境保持
正常。

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